如何培養(yǎng)LLC1細(xì)胞(二)?

如何培養(yǎng)LLC1細(xì)胞(二)?
　　如果漂浮的死細(xì)胞多，說明細(xì)胞有很多老化的，建議每次傳代的時候，在用胰酶消化之前，用PBS將細(xì)胞漂洗一遍，胰酶消化的時間要把握好，37℃2-3min即可，及時終止反應(yīng)，否則胰酶消化過度對細(xì)胞損傷較大，也會有很多死細(xì)胞出現(xiàn)的;吹打細(xì)胞的動作要輕柔。

　　體外培養(yǎng)的細(xì)胞，不論是元代細(xì)胞還是傳代細(xì)胞一般不包吃體內(nèi)原有的細(xì)胞形態(tài)。但大體可以分為兩種基本形態(tài)：成纖維樣細(xì)胞(LLC1細(xì)胞)與上皮樣細(xì)胞(LLC1細(xì)胞)。此外還有一些可移動的游走細(xì)胞。

　　某些傳代細(xì)胞還可用懸浮方法培養(yǎng)。

　　對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

　　此培養(yǎng)條件比較復(fù)雜，懸浮培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是能同時獲得大量細(xì)胞。

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