人臍靜脈血管內皮細胞的培養(yǎng)

人臍靜脈血管內皮細胞的培養(yǎng)
細胞接種培養(yǎng)

　　1、細胞接種：

　?。?）、包被液：用去離水配制0.5%明膠溶液，過濾除菌。

　　（2）、培養(yǎng)瓶包被：取2-4個T25培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶加2－3ml0.5%明膠溶液，搖勻使包被液布滿培養(yǎng)瓶底面，置37℃2小時或放置過夜。

　?。?）、人臍靜脈血管內皮細胞接種細胞：接種前吸凈包被液，按2500－5000個細胞/cm接種細胞（1支5×10個細胞可接種2-4個培養(yǎng)瓶），每瓶加培養(yǎng)液3-5ml,搖勻后置37℃5%CO2培養(yǎng)箱內培養(yǎng)24小時，此時細胞已完全貼壁，更換培養(yǎng)液后繼續(xù)在37℃5%CO2培養(yǎng)箱內培養(yǎng)。

　?。?）、人臍靜脈血管內皮細胞擴大培養(yǎng)：一般每周更換培養(yǎng)液2次，至細胞長至覆蓋培養(yǎng)面的70-80%可進行傳代或凍存。

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