人神經(jīng)干細(xì)胞(Cat.1650)分化于人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(hiPSC),hiPSC是用HDF中mRNA重組技術(shù)分離得到的。使用PSCNIM培養(yǎng)液(Cat.5931)可使單層HDF-hiPSC可有效地轉(zhuǎn)變?yōu)樯窠?jīng)上皮細(xì)胞,PSCNIM是一種無(wú)血清的可有效誘導(dǎo)多能干細(xì)胞增殖的培養(yǎng)液。GSK3和TGF-β的協(xié)同抑制可在LIF存在時(shí),于7天內(nèi)將HDF-hiPSC細(xì)胞向同質(zhì)神經(jīng)干細(xì)胞(NSC)分化。
該分化的NSC可由巢蛋白和SOX2特異性抗體進(jìn)行免疫熒光鑒定。細(xì)胞數(shù)量是高純度的:>90%的細(xì)胞表達(dá)巢蛋白,>80%的細(xì)胞表達(dá)SOX2活性。在復(fù)蘇之后,NSC可在HPSC神經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基中貼壁培養(yǎng),或在含**干細(xì)胞培養(yǎng)基的EGF和bFGF中形成**小球。傳代后,細(xì)胞會(huì)形成玫瑰花狀和神經(jīng)管狀結(jié)構(gòu),在含EGF和bFGF的**干細(xì)胞培養(yǎng)基中以高密度接種于Matrigel包被的培養(yǎng)瓶中。在用Matrigel包被的培養(yǎng)基中HiPSC-NSC可單層傳代幾個(gè)月,或接種于超低吸附培養(yǎng)瓶時(shí),可在**干細(xì)胞培養(yǎng)基中形成懸浮的神經(jīng)團(tuán)塊。NSC是多能的,可分化為多種神經(jīng)和神經(jīng)膠質(zhì)亞型。特殊圖形開端,如SHH、視黃酸和FGF8,在復(fù)蘇之后可直接引導(dǎo)細(xì)胞分化為不同的神經(jīng)系。
推薦培養(yǎng)基:神經(jīng)誘導(dǎo)細(xì)胞培養(yǎng)基 (PSCNIM, Cat. #5931)